養(yǎng)細胞之前,你的培養(yǎng)基選對了嗎?
MEM(Minimum Eagle medium 低*Eagle培養(yǎng)基),它僅含12種必須氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。廣泛適用于各種已建成細胞系的培養(yǎng),同時添加或減少某些成分,也適于特殊細胞的培養(yǎng)。如Hela細胞、各種成纖維細胞、內(nèi)皮細胞、人腫瘤細胞等。是哺乳動物細胞的理想培養(yǎng)基,通常用于貼壁細胞的培養(yǎng),通過對配方進行修正,可以用于其他類型細胞的培養(yǎng),如無鈣MEM培養(yǎng)基可以用于懸浮細胞的培養(yǎng),含有Hank’s鹽的MEM培養(yǎng)基可以用于二倍體細胞的培養(yǎng)。
DMEM分為高糖和低糖,碳酸氫鈉緩沖體系。是在Eagle MEM基礎上增加了各成分的用量(加倍),葡萄糖可以選擇低糖(1000mg/L)和高糖(4500mg/L),對于生長速度快,附著性差的腫瘤細胞生長有利。特別在附著性較差,但又不希望它脫離原來生長點的克隆培養(yǎng)時,采用高糖濃度的培養(yǎng)基效果較好,常用于雜交瘤技術(shù)中骨髓細胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細胞培養(yǎng)以及疫苗生產(chǎn)和各種初代病毒宿主細胞的細胞培養(yǎng)及單一細胞培養(yǎng)。
DMEM/F12培養(yǎng)基適于克隆密度的培養(yǎng)。F12培養(yǎng)基成分復雜,含有多種微量元素,和DMEM以1:1結(jié)合,稱為DMEM/F12培養(yǎng)基(DME/F12medium),作為開發(fā)無血清配方的基礎,以利用F12含有較豐富的成分和DMEM含有較高濃度的營養(yǎng)成分為優(yōu)點。該培養(yǎng)基適用于血清含量較低條件下哺乳動物細胞培養(yǎng)。為了增強該培養(yǎng)基的緩沖能力,改良之一是在DMEM/F12(1:1)中加入15mMHEPES緩沖液。
RPMI-1640主要用于懸浮細胞培養(yǎng),廣泛用于哺乳物,特殊造血細胞,正?;蛘邜盒栽錾陌准毎s交瘤細胞。另外K-562, L-60、urkat、IM-9 等淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細胞也可以使用。
McCoy’s 5A主要用于肉瘤細胞的培養(yǎng),還可以用于骨髓、皮膚、肺等原代培養(yǎng),用于作組織活檢培養(yǎng)、一些淋巴細胞培養(yǎng)以及一些難培養(yǎng)細胞的生長支持。比如HT29,BHL100等上皮細胞。
IMDM(Iscove’s Modified Dulbecco Medium)即 Iscove 改良的 DMEM 培養(yǎng)基,是 Guilber 和 Iscove 在1976年設計的,用以培養(yǎng)紅細胞前體細胞和巨噬細胞。IMDM 培養(yǎng)基在 DMEM 培養(yǎng)基的基礎上添加了硒、HEPES、丙 酮酸鈉以及額外的氨基酸和維生素,并用硝酸鉀代替了硝酸鐵,營養(yǎng)非常豐富,非常適合于快速增殖,高密度細胞 培養(yǎng)。IMDM 培養(yǎng)基不僅可以培養(yǎng)有特殊營養(yǎng)要求的細胞(如小鼠 B 淋巴細胞,LPS 刺激的 B 細胞,骨髓造血細胞,T淋巴細胞以及各種雜交瘤細胞),還可以作為一些*的無血清培養(yǎng)基的基礎液。
M199 Medium1950年Morgan等設計的具有確定化學成分的細胞培養(yǎng)液,即M-199。除BSS外,含有53種成分,為全面培養(yǎng)基,主要用于雞胚成纖維細胞培養(yǎng)。此培養(yǎng)液必須輔以血清才能支持長期培養(yǎng)。培養(yǎng)基199含有*的成分,包括腺嘌呤、腺苷、次黃嘌呤、胸腺嘧啶和其他維生素,可用于培養(yǎng)多種種屬來源的細胞,并能培養(yǎng)轉(zhuǎn)染的細胞。現(xiàn)廣泛用于病毒學、疫苗生產(chǎn)。
L-15培養(yǎng)液適用于快速增殖瘤細胞的培養(yǎng),用于在CO2缺乏的情況下培養(yǎng)腫瘤細胞株。此培養(yǎng)液采用磷酸鹽緩沖體系,氨基酸組成進一步改良,并由半乳糖替代了葡萄糖。適用于在CO2缺乏的情況下培養(yǎng)腫瘤細胞株,用于快速增值瘤細胞的培養(yǎng)。
Ham’s F-10 1963年Ham設計,含微量元素,可在血清含量低時用,適用于克隆化培養(yǎng)。F10適用于倉鼠、人二倍體細胞,特適于羊水細胞培養(yǎng)。
原配方 Ham's F-12 培養(yǎng)基適用于在無血清的條件下培養(yǎng) CHO 細胞。Ham’s F-12 營養(yǎng)培養(yǎng)基以 Ham’s F-10 培養(yǎng)基的配方為基礎,提高了膽堿、肌醇、腐胺和幾種氨基酸的濃度。其中含有 1800 mg/L 的D-葡萄糖,以及酚紅、丙酮酸鈉、L-谷氨酰胺、碳酸氫鈉,不含 HEPES。適用于無血清CHO細胞的生長,取代血清,適合哺乳動物細胞的培養(yǎng)(大鼠-干細胞和大鼠-前列腺細胞),同樣適用于癌細胞、大鼠成肌細胞、中國倉鼠肺細胞和大鼠、家兔、雞胚胎細胞。
MCDB131
MCDB 培養(yǎng)基是用于某些特殊細胞類型的培養(yǎng),是無血清培養(yǎng)基。這個培養(yǎng)基需要配添加生長因子,微量元素(trace elements)或者低水平透析胎牛血清。每個MCDB培養(yǎng)基的配方均適合特殊類型細胞的培養(yǎng),MCDB131最初開發(fā)是用于人微血管內(nèi)皮細胞(HMVEC)的培養(yǎng),現(xiàn)也可用于肝臟細胞、平滑肌細胞、心肌細胞及其他細胞的培養(yǎng)。
Opti-MEM I Reduced Serum Media
Opti-MEM I還原血清培養(yǎng)基是EMEM 的改良型培養(yǎng)基,其中使用了 HEPES 和碳酸氫鈉進行緩沖,并添加次黃嘌呤、胸苷、丙酮酸鈉、L-谷氨酰胺、痕量元素和生長因子??墒固ヅQ宓牧繙p少50%,且不改變生長速度或形態(tài)。Opti-MEM I培養(yǎng)基可用于多種哺乳動物細胞的懸浮和粘附,包括Sp2、AE-1、CHO、BHK-21、HEK和原代成纖維細胞。